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Alyson Hannigan, née en 1974 à Washington, grandit entre Atlanta et Los Angeles, où elle tourne ses premières publicités dès l’enfance. Après quelques apparitions, elle se fait remarquer au cinéma dans Ma belle-mère est une extra-terrestre face à Kim Basinger. La notoriété mondiale arrive en 1997 avec Willow Rosenberg dans Buffy contre les vampires, rôle tendre et malicieux qui accompagne une héroïne devenue iconique. Sur le plateau, elle évolue aux côtés de Sarah Michelle Gellar, Charisma Carpenter, Michelle Trachtenberg, Eliza Dushku, Emma Caulfield et Amber Benson.
Elle enchaîne avec le phénomène American Pie, qui marque une génération de comédies adolescentes, en partageant l’affiche avec Tara Reid, Shannon Elizabeth, Natasha Lyonne, Mena Suvari et Jennifer Coolidge. En 2006, elle mène la parodie Sexy Movie entourée de Sophie Monk, Carmen Electra et Jennifer Coolidge. De 2005 à 2014, elle devient Lily Aldrin dans How I Met Your Mother, comédie chorale où elle joue avec Cobie Smulders, Cristin Milioti, Jennifer Morrison et Britney Spears en invitée. Au fil des années, Alyson Hannigan multiplie les voix off, les émissions familiales et les engagements caritatifs, cultivant une image chaleureuse et accessible, de Sunnydale aux sitcoms qui ont marqué la pop culture.